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Northern Blot

  Northern blot 在1977年由斯坦福大學(xué)James Alwine，David Kemp和George Stark發(fā)明。因?yàn)槠浠驹砗筒僮鬟^程與Southern blot十分類似，所以稱為Northern blot，主要用于分析DNA/RNA雜交。他是一項(xiàng)用于檢測(cè)特異性RNA的雜交技術(shù)，根據(jù)相對(duì)分子量大小的不同，通過變性瓊脂糖凝膠或者聚丙烯酰胺凝膠電泳分離總RNA，將分離后的RNA印跡轉(zhuǎn)移到尼龍膜貨硝酸纖維素膜上，再與標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交反應(yīng)，通過雜交結(jié)果可以對(duì)RNA進(jìn)行定量或定性分析。

    由于Northern blot的靈敏度要好于基因芯片，與qPCR相比也有較高的特異性，可以有效的減少實(shí)驗(yàn)結(jié)果的假陽(yáng)性，Northern blot實(shí)驗(yàn)仍然被認(rèn)為是檢測(cè)基因表達(dá)的準(zhǔn)確方法。

服務(wù)流程

1，基因組RNA提取與質(zhì)檢  

2，RNA濃度測(cè)定

3，探針合成

4，Northern blot實(shí)驗(yàn)

5，實(shí)驗(yàn)結(jié)果掃描與報(bào)告整理

客戶提供

1，目的基因序列以及引物序列

2，DNA樣本、血液或者組織

備注：提供的DNA樣本必須完好，運(yùn)輸必須干冰運(yùn)輸，純度要高。

交付內(nèi)容

1，剩余的模板以及引物

2，完善的技術(shù)服務(wù)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，圖片，實(shí)驗(yàn)步驟等）

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用

1，檢測(cè)癌細(xì)胞中原癌基因表達(dá)量

2，器官移植過程中由于免疫排斥反應(yīng)造成某些基因表達(dá)量的上升

3，用來檢測(cè)目的基因是否具有可變剪切產(chǎn)物或者重復(fù)序列。

項(xiàng)目周期 2-3周