CRISPR Cas9 是一種由RNA指導(dǎo)Cas核酸酶對(duì)靶向基因進(jìn)行特定基因修飾的技術(shù),是細(xì)菌和古細(xì)菌在長期應(yīng)對(duì)病毒和質(zhì)粒不斷攻擊而演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御機(jī)制,其原理是Cas9蛋白通過導(dǎo)向性RNA(guide RNA,sgRNA)識(shí)別特定基因組位點(diǎn)并進(jìn)行剪切, 它能夠共定位 RNA、DNA 和蛋白,從而擁有巨大的改造潛力。將蛋白與無核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null)融合,并表達(dá)適當(dāng)?shù)?gRNA,即可靶定任何 dsDNA 序列,而 RNA 可連接到gRNA 的末端,不影響 Cas9 的結(jié)合。因此,Cas9 能在任何 dsDNA 序列處帶來任何融合蛋白及 RNA,這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力。目前已被廣泛應(yīng)用于基因組的精確編輯修飾,爾丙生物可以提供基于CRISPR / Cas9系統(tǒng)的基因敲除穩(wěn)定細(xì)胞系以及基因敲除小鼠服務(wù)。
服務(wù)流程
1. 細(xì)胞分型;
2. 細(xì)胞預(yù)實(shí)驗(yàn);
3. 針對(duì)敲除/敲入目的基因設(shè)計(jì)合適靶點(diǎn);
4. 構(gòu)建 cas9-gRNA表達(dá)質(zhì)粒并測(cè)序驗(yàn)證;
5. 目的細(xì)胞培養(yǎng),并將構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞;
6. 抗性篩選獲得單克隆細(xì)胞;
7. 基因敲除細(xì)胞系的檢測(cè)。
客戶提供
1. 待敲除目的基因信息,即靶向DNA信息;
2. 需構(gòu)建敲除株的細(xì)胞信息,如客戶提供細(xì)胞,新鮮細(xì)胞,灌滿培養(yǎng)基運(yùn)輸,或細(xì)胞凍存管,干冰運(yùn)輸。
結(jié)果交付
1. 基因敲除穩(wěn)定細(xì)胞株;
2. 驗(yàn)證報(bào)告;
3. 詳細(xì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑耗材、儀器設(shè)備、操作)及相關(guān)原始數(shù)據(jù)。
地址: 上海市浦東新區(qū)保稅區(qū)港澳路271號(hào)1號(hào)樓2樓 |
郵箱: sales@ubanbio.com |
電話: 18518291175 |